甜蜜素化學(xué)名為環(huán)己基氨基磺酸鈉，是食品生產(chǎn)中常用的添加劑，其甜度是蔗糖的30～40倍，常用于醬菜類、調(diào)味汁、糕點、果酒和飲料等食品中。如果經(jīng)常食用甜蜜素含量超標(biāo)的飲料或其他食品，就會因攝入過量而對人體的肝臟和神經(jīng)系統(tǒng)造成危害，特別是對代謝排毒能力較弱的老人、孕婦、兒童危害更明顯。因此，國家標(biāo)準(zhǔn)對甜蜜素的使用進(jìn)行了嚴(yán)格的限制，一些國家甚至已全面禁止在食品中使用甜蜜素。國標(biāo)方法GB/T5009.97-2003《食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測定》中第一法采用填充柱對甜蜜素進(jìn)行分離測定，但分離效果不好。本實驗通過反復(fù)試驗，優(yōu)化氣相色譜條件，建立了測定食品中甜蜜素毛細(xì)管柱氣相色譜法。 

1實驗部分

1.1儀器與試劑

日本島津公司GC-2010Plus氣相色譜儀，帶火焰離子化檢測器（FID），AOC-20i自動進(jìn)樣器，色譜柱為Rxi-5ms毛細(xì)管色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）；TGL-16G-W離心機。氯化鈉、亞硝酸鈉、硫酸均為分析純，正己烷為進(jìn)口色譜純，甜蜜素標(biāo)品濃度為10.0mg/mL。

1.2色譜條件

進(jìn)樣口溫度220℃，分流比為20∶1，檢測器溫度230℃，氫氣流量40mL/min，空氣流量400mL/min，尾吹30mL/min。載氣為純度大于或等于99.999%的氮氣，載氣流量為1.0mL/min。柱溫箱溫度：初溫30℃，保留1min，以6℃/min升至90℃，保留2min，以45℃/min升至220℃，保留3min。每個樣品用時19min左右，進(jìn)樣量1μL，以保留時間定性，以峰面積外標(biāo)法定量。

1.3測定步驟

1.3.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

從濃度為10.0mg/mL甜蜜素標(biāo)液中準(zhǔn)確吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，置于50mL具塞試管中，試管中甜蜜素含量分別為2、4、6、8、10mg，在試管中分別加蒸餾水至25mL，搖勻后置于冰浴中，分別加入5mL亞硝酸鈉（50g/L）和5mL硫酸溶液（100g/L），搖勻后放置冰浴中，30min后準(zhǔn)確加入10.0mL正己烷、5.0g氯化鈉，振搖1min（或振搖100次），靜置，15min后取上層正己烷相約1.5mL裝入氣相色譜儀專用樣品瓶中上機測定。

1.3.2試樣溶液的制備

固體試樣：稱取2.00～3.00g已粉碎的樣品于50mL具塞試管中，用超純水定容至50mL，浸泡60min（不時搖動），勻漿，過濾。取25mL濾液于50mL具塞試管中，將試管置于冰浴中，加5mL亞硝酸鈉（50g/L），以下同1.3.1。如樣品乳化，則放置15min后，用吸管吸取乳化層置于離心管中，在離心機中以2000r/min離心15min，取上層正己烷相上機分析。液體試樣：吸取10mL樣液，再稱量10mL樣液的質(zhì)量，置于50mL具塞試管中，用超純水定容至25mL，將試管置于冰浴中，加5mL亞硝酸鈉，以下同1.3.1。 

2結(jié)果與分析

2.1色譜條件的優(yōu)化及色譜圖

國標(biāo)方法GB/T5009.97-2003《食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測定》中第一法采用填充柱對甜蜜素進(jìn)行分離測定，80℃恒溫操作。實驗中發(fā)現(xiàn)，在填充柱恒溫條件下，正己烷與甜蜜素的保留時間非常接近，正己烷溶劑峰與甜蜜素峰分離度很不好。而本文實驗中用Rxi-5ms毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分離，采用優(yōu)化的色譜條件（初溫30℃，保留1min，以6℃/min升至90℃，保留2min，以45℃/min升至220℃，保留3min），正己烷溶劑峰與甜蜜素峰分離度很好，峰形好，且還減少了樣品中一些沸點較高的未知組分在色譜柱中的殘留，提高了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。正己烷中甜蜜素含量為2mg/mL的標(biāo)樣色譜見圖1。由圖1可知，在本實驗條件下甜蜜素的保留時間為8.299min。

2.2樣品中甜蜜素的提取

固體樣品都含有一定的水分，用搗碎機處理不容易將樣品完全搗碎，采用機械振蕩及超聲波處理等方法，不能將樣品中的甜蜜素完全提取出來，會使測定結(jié)果偏低。本實驗將樣品切碎，加蒸餾水浸泡60min后，勻漿，樣品中的甜蜜素能最大限度地被提取出來，測定結(jié)果更準(zhǔn)確。圖2為果味飲料中甜蜜素提取后的圖譜。

2.3線性相關(guān)性測定結(jié)果

按1.3.1制備含量為2、4、6、8、10mg的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.2的色譜條件，得到相應(yīng)的峰面積分別為7107.1、14291.7、21467.5、28943.9、36802.0。以峰面積為橫坐標(biāo)，以甜蜜素含量為縱坐標(biāo)，其線性回歸方程：Y＝0.0003X＋0.1346，相關(guān)系數(shù)為0.9998。說明此方法線性相關(guān)性較好。

2.4結(jié)果計算

2.5方法準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度測定

在月餅樣品中添加甜蜜素標(biāo)樣，使樣品中甜蜜素的含量分別為0.20、0.40、0.80g/kg；在飲料樣品中添加甜蜜素標(biāo)樣，使樣品中甜蜜素的含量分別為0.10、0.50、1.00g/kg。每個添加濃度做3次平行測定，根據(jù)試驗結(jié)果計算回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，測定結(jié)果見表1。由表1可以看出，平均回收率為90.7%～99.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.59%～3.69%，說明該方法具有較好的準(zhǔn)確度和精密度。

5結(jié)論

本實驗中，用Rxi-5ms毛細(xì)管色譜柱分離，火焰離子化檢測器（FID）在優(yōu)化的色譜條件下，測定得出的甜蜜素峰形好，雜峰干擾小。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)性好，方法回收率高，可以滿足實際檢測的需要。

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