3.3 響應(yīng)面分析

應(yīng)用Design-Expert.V8.0.6軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，得到白芷揮發(fā)油得率與各因素之間交互作用的三維效應(yīng)曲面圖，如圖5～圖10。由圖可知，白芷揮發(fā)油得率隨著液料比、浸泡時(shí)間、提取時(shí)間和粉碎粒度的增加，呈現(xiàn)先增加后減小的變化趨勢(shì)，各因素間的交互作用明顯，與方差分析的結(jié)果一致。

3.4 優(yōu)化提取參數(shù)與試驗(yàn)驗(yàn)證

通過(guò)建立的數(shù)學(xué)模型分析，可預(yù)測(cè)得到白芷揮發(fā)油的最佳提取工藝條件為液料比為19.67∶1mL/g、浸泡時(shí)間為2.28h、提取時(shí)間為5.36h、粉碎粒度為66.14目，在此條件下的揮發(fā)油得率為2.274%?？紤]到操作的可行性和白芷揮發(fā)油提取的實(shí)際條件，對(duì)預(yù)測(cè)工藝條件進(jìn)行修正。確定最終的白芷揮發(fā)油最優(yōu)提取工藝條件為：液料比為20∶1mL/g、浸泡時(shí)間為2.3h、提取時(shí)間為5.4h、粉碎粒度為65目，此時(shí)的白芷揮發(fā)油得率為2.273%，與預(yù)測(cè)值接近，說(shuō)明建立的模型真實(shí)可靠，可以比較準(zhǔn)確地描述白芷揮發(fā)油提取工藝中液料比A（mL/g）、浸泡時(shí)間B（h）、提取時(shí)間C（h）、粉碎粒度C（目）4個(gè)因素與揮發(fā)油得率Y之間的關(guān)系。

3.5 體外抗氧化活性測(cè)定結(jié)果

3.5.1 DPPH自由基清除作用

如圖11所示，當(dāng)白芷揮發(fā)油濃度從0.2mg/mL增加到1.2mg/mL，對(duì)DPPH自由基的清除率從16.81%增加到82.12%，其IC50為0.722mg/mL，隨著揮發(fā)油濃度的增加，其對(duì)DPPH自由基的清除率也隨之增加，表明白芷揮發(fā)油對(duì)DPPH自由基有一定的清除作用，其抗氧化作用弱于VC。

3.5.2 羥自由基清除作用

如圖12所示，當(dāng)白芷揮發(fā)油濃度從0.2mg/mL增加到1.2mg/mL，對(duì)羥自由基的清除率從12.41%增加到68.12%，其IC50為0.882mg/mL，表明白芷揮發(fā)油對(duì)羥自由基有一定的清除作用，其抗氧化作用弱于VC。

4 結(jié)論

基于白芷揮發(fā)油的藥用價(jià)值，以白芷為原料，通過(guò)單因素試驗(yàn)和Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化水蒸氣蒸餾法提取白芷揮發(fā)油的提取工藝，最佳提取條件為：液料比為20∶1mL/g、浸泡時(shí)間為2.3h、提取時(shí)間為5.4h、粉碎粒度為65目，此時(shí)的白芷揮發(fā)油得率為2.273%，說(shuō)明采用Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化白芷揮發(fā)油的提取方法可行、可靠。并對(duì)在此條件下提取得到的白芷揮發(fā)油測(cè)定了對(duì)DPPH自由基和羥基自由的清除效果，考察其抗氧化活性。結(jié)果表明：白芷揮發(fā)油具有較強(qiáng)的抗氧化性，且隨著揮發(fā)油濃度的增大，其抗氧化活性增強(qiáng)，并呈線性關(guān)系。本研究通過(guò)優(yōu)化白芷揮發(fā)油的提取工藝，為白芷揮發(fā)油產(chǎn)品的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供了一定的理論基礎(chǔ)，白芷揮發(fā)油的抗氧化活性研究，對(duì)于開(kāi)發(fā)天然來(lái)源的美白化妝品、食品抗氧化劑和保鮮劑有一定的現(xiàn)實(shí)意義和參考價(jià)值。

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