(2)提取

吸取濾液100mL置于250mL分液漏斗中，加入6mol/L鹽酸溶液至酸性(用石蕊試紙?jiān)囼?yàn))，再加6mol/L鹽酸3mL，分別用40，30，30mL乙醚用旋轉(zhuǎn)方法依次分三次提取，每次搖動(dòng)不少于5min，合并三次提取液置于另一250mL分液漏斗中。

用蒸餾水洗滌乙醚提取液至不呈酸性(用石蕊試紙?jiān)囼?yàn))，將提取液置于錐形瓶中，在45℃水浴上回收并揮干乙醚(或用索氏抽提法)。

(3)滴定

加入30mL中性醇醚混合溶液，加入10mL水及2滴酚酞指示劑，以0.05mol/L氫氧化鈉準(zhǔn)溶液滴定至微紅色為止，記錄消耗堿量。

4、注意事項(xiàng)

①本滴定法適用于樣品中苯甲酸含量在0.1％以上的分析。

②提取劑可以用三氯甲烷代替。

③當(dāng)樣品中苯甲酸含量較低時(shí)，氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度可配成0.01mol／L為宜。

④用乙醚提取苯甲酸時(shí)，不可上下振蕩以免乳化而不易分離，應(yīng)用旋轉(zhuǎn)分液漏斗進(jìn)行提取，若形成乳化，可用玻棒攪拌，或進(jìn)行一兩次上下激烈振蕩。

(二)氣相色譜法

1、原理

樣品酸化后，用乙醚提取苯甲酸，用附氫火焰離子化檢測(cè)器的氣相色譜儀進(jìn)行分離測(cè)定與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

2、試劑

①醚：不含過氧化物。

②油醚：沸程30～60℃。

⑧鹽酸：(1+1)。

④無水硫酸鈉。

⑤氯化鈉酸性溶液：40g／L。于氯化鈉溶液(40g/L)中加少量鹽酸(1+1)酸化。

⑥苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確稱取苯甲酸0.2000g，置于100mL容量瓶中，用石油醚-乙醚(3+1)混合溶劑并稀釋至刻度(此溶液每毫升相當(dāng)于2.0mg苯甲酸)。

⑦苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)使用液。吸取適量的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，以石油醚-乙醚(3+1)混合溶劑稀釋至每毫升相當(dāng)于50μg，1001μg，150μg，200μg，250μg苯甲酸。

3、儀器

氣相色譜儀，具有氫火焰離子化檢測(cè)器。

4、操作方法

①樣品提?。悍Q取2.5g事先混合均勻的樣品，至于25mL帶塞量筒中，加0.5mL鹽酸(1+1)酸化，用15mL、10mL乙醚提取兩次，每次振搖1min，靜置分層后將上層乙醚提取液吸入另一個(gè)25mL帶塞量筒中，合并乙醚提取液。用3mL氯化鈉酸性溶液(40g/L)洗滌兩次，靜置15min，用滴管將乙醚層通過無水硫酸鈉濾入25min容量瓶中，用乙醚洗量筒及硫酸鈉層，洗液并入容量瓶。加乙醚至刻度，混勻。準(zhǔn)確吸取5mL乙醚提取液于5mL帶塞刻度試管中，置40℃水浴上揮干，加入2mL石油醚-乙醚(3+1)混合溶劑溶解殘?jiān)?，備用?/p>

②色譜參考條件：

a．色譜柱：玻璃柱，內(nèi)徑3mm，長(zhǎng)2m，內(nèi)涂裝以5％DEGS+1％H₃P0₄同定液的60—80目Chromosotd WAW。

b．氣流速度：載氣為氮?dú)猓?0mL/min(氮?dú)夂涂諝狻錃庵劝锤鲀x器型號(hào)不同選擇各自的最佳比例條件)。

c．溫度：進(jìn)樣口230℃；檢測(cè)器230℃：柱溫1700℃。

③測(cè)定：進(jìn)樣2μL標(biāo)準(zhǔn)系列中各濃度標(biāo)準(zhǔn)使用液于氣相色譜儀中，可測(cè)得不同濃度苯甲酸的峰高，以濃度為橫坐標(biāo)、相應(yīng)的峰高值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí)進(jìn)樣2μL樣品溶液。測(cè)得峰高與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。

參考資料：食品中有毒有害物質(zhì)檢測(cè)

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