2.2菌株DTC03產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶酶學(xué)性質(zhì)研究

2.2.1α-L-鼠李糖苷酶的最適溫度及熱穩(wěn)定性

如圖4所示，菌株DTC03產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶在20～40℃溫度下，隨著溫度上升，相對(duì)酶活力呈上升趨勢(shì)。40～70℃下，相對(duì)酶活力隨著溫度的上升呈下降趨勢(shì)，且溫度處于50～70℃時(shí)，隨溫度的升高，酶活力迅速下降。溫度在40℃時(shí)相對(duì)酶活力最高。同一種酶來(lái)源不同，環(huán)境不一，其酶學(xué)性質(zhì)也有所差異。目前研究表明，α-L-鼠李糖苷酶的最適溫度多在40℃至65℃之間。

菌株DTC03產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶的熱穩(wěn)定性結(jié)果見(jiàn)圖5。隨著環(huán)境溫度的升高，保溫1h后酶的相對(duì)酶活降低。20～40℃相對(duì)酶活下降較慢。40～60℃相對(duì)酶活下降顯著。溫度達(dá)到70℃時(shí)酶活降為零。在50℃溫度范圍內(nèi)保溫持1h后，仍有50%以上的相對(duì)酶活。

2.2.2α-L-鼠李糖苷酶的最適pH及pH穩(wěn)定性

菌株DTC03產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶的最適pH結(jié)果見(jiàn)圖6。當(dāng)緩沖液pH為4.0時(shí)，相對(duì)酶活力低于20%。當(dāng)緩沖液pH從4.0提高到7.0時(shí)，相對(duì)酶活力呈上升趨勢(shì)。當(dāng)緩沖液pH從7.0提高到9.0時(shí)，相對(duì)酶活力呈下降趨勢(shì)。當(dāng)pH為7.0時(shí)，相對(duì)酶活最高。目前報(bào)道的微生物a-L-鼠李糖苷酶最適pH在4.0～7.0之間。

菌株DTC03產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶的pH穩(wěn)定性測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖7。酶液在pH4.0緩沖液中靜置12h后酶的相對(duì)酶活低于20%，在pH9.0的緩沖液中靜置12h后酶的相對(duì)酶活低于30%。酶液在pH6.0～8.0緩沖液中靜置12h后仍有60%以上的相對(duì)酶活，在pH7.0的中性緩沖液中相對(duì)酶活最高。

2.2.3金屬離子對(duì)α-L-鼠李糖苷酶活性的影響

金屬離子對(duì)菌株DTC03產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶的影響測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖8。Al³⁺和Ba²⁺對(duì)酶活有顯著激活作用。Cu²⁺、N²⁺、Cd²⁺對(duì)酶有抑制作用。

3.結(jié)論

從高公島海域泥樣中篩選獲得了一株產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶的菌株DTC03，經(jīng)鑒定該菌株為細(xì)菌Bacillusvelezensis，目前尚無(wú)Bacilusvelezensis產(chǎn)α-L-鼠李糖苷酶的報(bào)道。該菌株α-L-鼠李糖苷酶最適溫度為40℃，在低溫條件下有較好的熱穩(wěn)定性。最適pH為7.0，在pH6.0～8.0區(qū)間內(nèi)酶活性穩(wěn)定。Al³⁺和Ba²⁺對(duì)酶活有顯著激活作用。Cu²⁺、Ni²⁺、Cd²⁺對(duì)酶有抑制作用。BacillusvelezensisDTC03α-L-鼠李糖苷酶有較好的工業(yè)應(yīng)用潛力。

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