目的 建立砂藍(lán)刺頭Echinops gmelini的質(zhì)量控制方法。方法 采用薄層色譜法,以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(6∶1∶1∶0.8)為展開劑對(duì)砂藍(lán)刺頭花中1-甲基-4-甲氧基-8-(β-D-葡萄吡喃型糖苷)-2(1H)-喹啉酮(MMQ)進(jìn)行定性鑒別；建立砂藍(lán)刺頭HPLC指紋圖譜,并對(duì)MMQ的含量測(cè)定方法進(jìn)行研究。

結(jié)果 建立的TLC方法對(duì)照品斑點(diǎn)清晰,分離度好；建立的指紋圖譜分析方法能夠區(qū)分砂藍(lán)刺頭與近源植物,標(biāo)定了8個(gè)特征峰,并指認(rèn)出其中4個(gè)成分。定量方法測(cè)定結(jié)果顯示MMQ在2.024～151.800μg/mL呈良好線性關(guān)系,平均加樣回收率為101.54%,RSD為1.46%。7批樣品中MMQ的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.13%～0.53%。結(jié)論 建立的質(zhì)量控制方法科學(xué)、可靠,可為砂藍(lán)刺頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

菊科藍(lán)刺頭屬Echinops L.植物在全世界有120余種，分布于南歐、北非和中亞。我國(guó)有19種，主要分布于我國(guó)東北、華北及西北地區(qū)。藍(lán)刺頭屬植物中含有有機(jī)酸類、噻吩類、黃酮類和生物堿類等化學(xué)成分。該屬植物多數(shù)有藥用價(jià)值，在我國(guó)中醫(yī)藥或者少數(shù)民族醫(yī)藥中均有所應(yīng)用，具有抗腫瘤、降血糖、抗炎、抗氧化等多種藥理活性。

砂藍(lán)刺頭E.gmelini Turcz.為民間常用藥材，在遼寧、吉林、內(nèi)蒙古、寧夏、陜西、甘肅、青海、新疆等省區(qū)沙漠地區(qū)均有分布。其藥用部位包括干燥根、頭狀花序以及全草。根為常用中藥，具有清熱解毒、通乳、排膿的功效，多入湯劑。在蒙醫(yī)中，全草具有止血、安胎、舒筋通脈的功效；頭狀花序有固骨質(zhì)、接骨愈傷、清熱止痛之效，可治療骨折、骨熱、刺痛以及瘡瘍等疾病。

相關(guān)研究主要集中在砂藍(lán)刺頭植物的化學(xué)成分提取分離以及生態(tài)資源等方面。未見關(guān)于砂藍(lán)刺頭花的有效成分和質(zhì)量評(píng)價(jià)的研究報(bào)道。本課題組前期從砂藍(lán)刺頭花（簡(jiǎn)稱EGT）中分離得到了1-甲基-4-甲氧基-8-(β-D-葡萄吡喃型糖苷)-2(1H)-喹啉酮（1-methyl-4-methoxy-8-(β-D-glucopyranoside)-2(1H)-quinolinone，以下簡(jiǎn)稱MMQ）。以其為指標(biāo)，建立EGT的薄層鑒別和含量測(cè)定方法，并結(jié)合指紋圖譜進(jìn)行多成分定性評(píng)價(jià)，從而達(dá)到對(duì)EGT的定性和定量控制的目的。

1 材料

1.1 儀器

Linomat-Ⅵ型薄層色譜自動(dòng)點(diǎn)樣器（瑞士CAMAG公司）、Reprostar 3型薄層色譜攝像儀（瑞士CAMAG公司）、Mettler AE200型電子分析天平、KQ-250DB數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、Waters e2695 HPLC色譜儀、SX2-4-10型系列箱式電阻爐（上海陽(yáng)光實(shí)驗(yàn)儀器）。

1.2 試藥

EGT樣品S1（批號(hào)20180823）、S2（批號(hào)20180830）、S6（批號(hào)20180901）、S7(20180905），均采集于內(nèi)蒙古通遼；S3（批號(hào)20180811）采集于內(nèi)蒙錫林郭勒；S4（批號(hào)20180811）采集于內(nèi)蒙錫林浩特；S5（批號(hào)20180905）采集于內(nèi)蒙科左中旗；S8（批號(hào)20120814）和S9（批號(hào)20120815），采集于甘肅張掖；大藍(lán)刺頭花樣品S10（批號(hào)20110730），采集于新疆阿勒泰；硬葉藍(lán)刺頭花樣品S11（批號(hào)20120801），采集于新疆阿勒泰，S12（批號(hào)20110725）和S13（批號(hào)20120728）采集于新疆烏魯木齊；全緣藍(lán)刺頭花樣品S14（批號(hào)20120801）和S15（批號(hào)20110731）采集于新疆阿勒泰；藍(lán)刺頭花樣品S16（批號(hào)20101110）采集于內(nèi)蒙古。以上藥材經(jīng)上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心吳立宏研究員分別鑒定為砂藍(lán)刺頭E.gmelini Turcz.、大藍(lán)刺頭E.talassicus Golosk.、硬葉藍(lán)刺頭E.ritro L.、全緣藍(lán)刺頭E.integrifolius Karet Kir.和藍(lán)刺頭E.latifolius Tausch.的干燥頭狀花序。MMQ對(duì)照品由實(shí)驗(yàn)室自制，HPLC面積歸一化法，質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于98%。乙腈（色譜純，美國(guó)Fisher公司），水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 MMQ的分離與制備

取EGT藥材1.2 kg,95%乙醇回流提取3次、60%乙醇回流提取1次，提取1～2 h，回收乙醇。將濃縮液依次用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取，合并并回收各有機(jī)溶劑。取正丁醇部位過MCI小孔樹脂，依次用不同濃度甲醇水體系洗脫，取30%甲醇段減壓濃縮后得浸膏5 g，通過硅膠和MCI等手段，分離得到目標(biāo)化合物。經(jīng)1H-NMR、13C-NMR鑒定，確定該成分為生物堿類化合物MMQ，經(jīng)HPLC面積歸一法測(cè)定其質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于98%。

2.2 薄層色譜鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備

取EGT粉末（過3號(hào)篩）0.25 g，加70%甲醇25 m L，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%甲醇2 m L使溶解，作為供試品溶液。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

取MMQ適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度為1 mg/m L的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.3 薄層色譜分別吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液

各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠HSGF254薄層板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（6∶1∶1∶0.8）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。采用上述色譜方法對(duì)7批不同產(chǎn)地的EGT藥材（S1～S7）進(jìn)行薄層色譜鑒別（S8、S9因采集時(shí)間較久，未采用），結(jié)果樣品中MMQ分離度較良好，斑點(diǎn)清晰，比移值（Rf）合適，并且7批藥材具有良好的一致性，見圖1。

2.3 指紋圖譜的建立

2.3.1 供試品溶液的制備

取EGT樣品（S5，過3號(hào)篩）0.25 g，精密稱定，置100 m L具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 m L，稱定質(zhì)量，超聲（功率250 W，頻率40 k Hz）處理30 min，放冷，用70%甲醇補(bǔ)充減失質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

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