2.結(jié)果與討論

2.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程

根據(jù)圖1可看出，樣液濃度與吸光度值在0～80mg/L之間成正比，有良好的線性關(guān)系，樣液濃度越高，吸光值越大。

2.2單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1料液比對(duì)總黃酮提取率的影響

從圖2看出，料液比增大，黃酮含量緩慢增加，并且料液比為1∶10時(shí)黃酮含量最大，為1.45g/100g；當(dāng)料液比繼續(xù)增大時(shí)，黃酮含量不再增加，反而減小。這是因?yàn)?，?dāng)荷葉粉末的量不變，乙醇的量不斷增大，黃酮與乙醇接觸的可能性變大。當(dāng)黃酮完全溶解時(shí)，黃酮含量為定值，乙醇的量仍舊增大，從而出現(xiàn)沉淀，使黃酮含量減小。

2.2.2實(shí)驗(yàn)溫度對(duì)總黃酮提取率的影響

由圖3可見，黃酮含量隨著溫度的增高而增加，并且在實(shí)驗(yàn)溫度為45℃時(shí)黃酮含量達(dá)到最大，為1.28g/100g。當(dāng)實(shí)驗(yàn)溫度超過45℃時(shí)，隨著溫度的升高黃酮含量不再增加，而是呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。這是因?yàn)閺臒釀?dòng)力學(xué)角度來看，溫度升高會(huì)加速物質(zhì)的運(yùn)動(dòng)，還會(huì)加速溶劑與被提取物之間的物質(zhì)交換，從而提高荷葉總黃酮的析出；但是黃酮本身具有還原性，溫度過高會(huì)導(dǎo)致黃酮類化合物發(fā)生水解反應(yīng)，所以荷葉總黃酮的析出減少。

2.2.3乙醇濃度對(duì)總黃酮提取率的影響

由圖4可見，乙醇濃度為75%時(shí)，黃酮含量最高，為1.56g/100g，乙醇濃度更高時(shí)，黃酮含量下降。造成這個(gè)現(xiàn)象的原因可能是因?yàn)樵谝欢ǚ秶鷥?nèi)所用乙醇濃度越大，溶劑極性就越小，而且黃酮類物質(zhì)極性偏低。根據(jù)相似相溶原理，溶劑極性小有利于荷葉總黃酮類化合物的析出；但是當(dāng)乙醇濃度超過一定范圍時(shí)，溶劑的極性不再減小，反而增大，所以荷葉總黃酮的析出減少。

2.2.4超聲時(shí)間對(duì)總黃酮提取率的影響

由圖5可見，隨超聲時(shí)間增加黃酮含量逐漸上升。60min時(shí)，黃酮含量出現(xiàn)峰值1.55g/100g。時(shí)間延長(zhǎng)，黃酮含量下降。因?yàn)樘崛〕跗冢晻r(shí)間長(zhǎng)利于荷葉總黃酮的析出，但是時(shí)間過長(zhǎng)，加熱導(dǎo)致黃酮類化合物水解，黃酮含量下降。

2.3最佳工藝條件優(yōu)化

根據(jù)正交表排列，進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，得到表2所示結(jié)果。由表2可知，影響總黃酮提取率的4種因素的影響程度為：D＞B＞C＞A，即：溶劑濃度、溫度、料液比、時(shí)間。所以超聲提取荷葉總黃酮最優(yōu)的提取組合為：

A₁B₂C₃D₂，即：提取溶劑為75%濃度的乙醇溶液，料液比選用1∶12（g/mL），超聲時(shí)間為45min，提取溫度為45℃。

2.4荷葉總黃酮抗氧化性研究

2.4.1總黃酮對(duì)DPPH·清除能力測(cè)定

由圖6可看出，荷葉總黃酮對(duì)DPPH自由基的清除能力與總黃酮的濃度成正比例關(guān)系，當(dāng)黃酮含量達(dá)到0.400mg/mL時(shí)，清除率達(dá)到了58%，相比較VC濃度為0.400mg/mL時(shí)清除率偏低。由此可以得出，荷葉總黃酮對(duì)DPPH的清除能力比較強(qiáng)，稍弱于VC。

2.4.2總黃酮對(duì)羥自由基清除能力測(cè)定

由圖7看出，荷葉黃酮對(duì)羥自由基有一定的清除能力。隨著荷葉總黃酮和Vc質(zhì)量濃度的增加，兩種物質(zhì)清除羥自由基的能力逐漸增加。當(dāng)黃酮的濃度與Vc濃度相同時(shí)，對(duì)羥自由基的清除率分別為52.9%、59.5%。由此可得荷葉總黃酮清除羥自由基的能力比Vc稍弱。
 

3.結(jié)束語

實(shí)驗(yàn)通過對(duì)超聲波法提取荷葉總黃酮過程中的四種可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素進(jìn)行研究與分析，并對(duì)總黃酮的抗氧化能力進(jìn)行測(cè)定，得出四種因素對(duì)總黃酮提取含量的影響大小順序?yàn)椋阂掖紳舛龋境暅囟龋玖弦罕龋境晻r(shí)間。通過單因素與正交實(shí)驗(yàn)得出最佳的實(shí)驗(yàn)方案為：超聲時(shí)間45min，溫度45℃，料液比1∶12（g/mL），乙醇濃度75%。荷葉總黃酮具有一定的抗氧化性，且抗氧化性隨濃度的增大而增強(qiáng)，但比等濃度的Vc的清除能力要低，表明荷葉提取物可以作為有效的抗氧化成分來進(jìn)行開發(fā)研究。

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