北方偉業(yè)計量集團有限公司
理化檢測法是利用抗生素分子中的基團所具有的特殊反應或性質來測定其含量,常用的有:氣相色譜法、高效液相色譜法、聯(lián)用技術等,能進行定性定量和藥劑鑒定,敏感性較高。
一、理化檢測法--氣相色譜法(GC):氣相色譜法是以氣體作為流動相,被測樣品由載氣帶入色譜柱,以吸附色譜或分配色譜使不同組分分離,按順序從色譜柱流出。再經過檢測器將組分信號轉換并記錄,達到定性定量分析。其樣品前處理包括提取、甲基化和凈化3個步驟,采用進樣口升溫的方式,可以提高測定的靈敏度。該方法與質譜技術結合,可以對青霉素類、氨基糖苷類、四環(huán)素類等抗生素進行定性定量分析。
二、理化檢測法--高效液相色譜法(HPLC):HPLC引用了GC理論,在技術上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器,經過樣品的提取、脫蛋白、離心、層析柱凈化、衍生化等步驟進行殘留藥物的分離和檢測,由于HPLC不需高溫條件,故適于易受熱分解,不易氣化的殘留成分分析。HPLC是國內藥物殘留檢測應用最普遍、最有效的分析方法,其特點是靈敏度高、檢測限低、方法穩(wěn)定。由于氨基糖苷類和大環(huán)內酯類抗生素均無紫外吸收,故一般采用離子交換色譜來測定這類抗菌藥物。但是對于絕大多數(shù)抗生素多采用反相色譜法,其中最常用的檢測方法就是紫外檢測器和熒光檢測器。
三、理化檢測法--聯(lián)用技術:聯(lián)用技術包括GC-MS、LC-MS 和毛細管區(qū)帶電泳-質譜聯(lián)用法(CZE-MS) 等。實現(xiàn)了高效層析分離和檢測聯(lián)機,可用微電腦控制層析條件、程序和數(shù)據處理,其特異性、靈敏度和重復性均好,并可一次同時完成同一樣本中多種藥物及其代謝物檢測。聯(lián)用技術的檢出限要低于HPLC方法。因此,聯(lián)用技術在食品殘留藥物檢測中的應用越來越廣泛。
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