3.4.6中間精密度試驗

由本實驗室其他實驗人員在不同時間和不同液相色譜儀上操作，對同一批參柏洗劑（批號：20200501），按“3.3”項下方法分別制備6份供試液，按照“3.1.5”項下色譜條件測定含量，結(jié)果苦參堿和氧化苦參堿總和RSD為1.86%（n=12），表明所建含量測定方法中間精密度良好。

3.4.7加樣回收率試驗

取同一批次參柏洗劑（批號：20200501）9份，每份5 mL，分別加入一定量的苦參堿和氧化苦參堿對照品，按照“3.3”項下方法制備供試品溶液，再按“3.1.5”項下色譜條件測定，計算苦參堿、氧化苦參堿回收率，結(jié)果苦參堿平均回收率為99.27%，RSD為2.11%，氧化苦參堿平均回收率為103.07%，RSD為1.68%，表明所建立方法回收率良好，結(jié)果見表1、2。

3.4.8參柏洗劑樣品含量測定

精密量取參柏洗劑離心后的上清液10 mL，置分液漏斗中，加入濃氨試液0.5 mL，搖勻，加三氯甲烷振搖提取4次，20 mL/次，合并三氯甲烷液，回收溶劑至干，殘渣加無水乙醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，并加無水乙醇至刻度，搖勻，即得。

測定方法分別精密吸取苦參堿和氧化苦參堿對照品溶液10 μL與供試品溶液5 μL，進樣，測定，結(jié)果見表3。

結(jié)果顯示，不同批次參柏洗劑苦參堿和氧化苦參堿含量存在一定差異，推測與投料飲片質(zhì)量參差不齊有關系。目前暫時測定了三批次參柏洗劑含量，日后將繼續(xù)積累多批次樣品含量測定數(shù)據(jù)，并根據(jù)測定結(jié)果確定合理的含量限度，以較好地控制參柏洗劑質(zhì)量。

4討論與小結(jié)

（1）本研究在參柏洗劑現(xiàn)行版標準基礎上，增加了苦參堿、槐定堿、鹽酸小檗堿對照品鑒別，使原有鑒別方法更有針對性；并通過試驗摸索，使用苦參、黃柏鑒別項下供試品溶液，也可鑒別出臣藥-地骨皮，增加了臣藥薄層色譜鑒別方法。該制劑標準中3味中藥的薄層色譜鑒別方法，均可采用同一份供試品溶液，操作簡單方便，既可節(jié)約有機試劑，又可減少環(huán)境污染。

（2）研究過程中增加了參柏洗劑定量控制指標成分，在參柏洗劑苦參堿和氧化苦參堿含量測定研究過程中，根據(jù)生物堿類成分性質(zhì)，加濃氨試液堿化樣品，使生物堿更好地游離出來。提取過程中考察了樣品是否離心再提取、加濃氨試液后是否靜置一段時間再提取、以及三氯甲烷提取次數(shù)。結(jié)果顯示：樣品離心后再提取，可以減少乳化現(xiàn)象，且樣品含量測定數(shù)據(jù)平行性較好；樣品加濃氨試液搖勻，靜置與否，苦參堿和氧化苦參堿含量測定結(jié)果基本一致，為節(jié)約時間，確定為樣品加濃氨試液搖勻后，無需靜置，可直接進行提??；為確保樣品中苦參堿和氧化苦參堿可被充分提取，分別考察了提取3次、4次、5次的效果，結(jié)果顯示，加三氯甲烷提取4次，苦參堿和氧化苦參堿可被提取完全，最終確定了本研究中含量測定供試品溶液的處理方法。

（3）本研究建立完善的參柏洗劑質(zhì)量標準方法簡單、重復性好，準確可靠，為參柏洗劑的質(zhì)量標準修訂提供依據(jù)，可用作該藥的質(zhì)量控制標準。

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