（3）提取溫度的選擇

提取溫度對(duì)多酚提取率的影響如圖3所示。

分析圖3數(shù)據(jù)可知，當(dāng)提取溫度從15℃升至35℃時(shí)多酚得率隨之升高，繼續(xù)升高提取溫度，多酚得率反而呈下降趨勢(shì)。這主要是由于溫度的升高增加了提取物的溶解度和擴(kuò)散系數(shù)，但也會(huì)引起熱敏性多酚的降解，降低得率。

（4）物料比的選擇

物料比對(duì)多酚提取率的影響見圖4。隨著物料比增加，提取液中的多酚含量增加，當(dāng)物料比大于1：9以后，繼續(xù)增加溶劑用量，多酚得率有所下降。為了達(dá)到較高的提取率，且節(jié)約提取成本，選擇物料比1：9。

2、響應(yīng)面確定最優(yōu)提取條件實(shí)驗(yàn)

（1）響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

在單因素研究乙醇濃度、提取時(shí)間、提取溫度和提取物料比的基礎(chǔ)上，根據(jù)Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，以多酚提取得率為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)四因素三水平的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)，按照響應(yīng)面設(shè)計(jì)進(jìn)行多酚提取實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表2所示。

使用Minitab15.0軟件對(duì)表2中響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸分析，得到以南極磷蝦多酚提取得率（Y）為目標(biāo)因子，以乙醇濃度（A）、提取時(shí)間（B）、提取溫度（C）和提取料液比（D）為變量的二次多項(xiàng)式回歸方程：

Y=1.1937+0.1108A+0.0195B+0.0468C+0.1158D-0.2402A²-0.1623B²-0.0970C²-0.2364D²-0.0750AB-0.1845AC+0.1298AD-0.0335BC+0.0460BD+0.0195CD

（2）回歸方程方差分析

對(duì)實(shí)驗(yàn)擬合所得回歸方程進(jìn)行方差分析，結(jié)果如表3所示。

從表3可以看出，該模型的相關(guān)系數(shù)R²=98.80%，調(diào)整系數(shù)R²_Adj=97.41，說(shuō)明方程具有良好的擬后情況，可以真實(shí)反映溶液濃度（A）、提取時(shí)間（B）、提取溫度（C）和提取料液比（D）與響應(yīng)值多酚提取率之間的關(guān)系，可以用來(lái)進(jìn)行較為準(zhǔn)確的響應(yīng)值分析與預(yù)測(cè)。方程一次項(xiàng)A、C與D的P值小于0.05，說(shuō)明溶劑濃度、提取溫度和提取料液比的變化對(duì)多酚提取率的影響顯著，一次項(xiàng)B的P值為0.06＞0.05，說(shuō)明提取時(shí)間的變化對(duì)多酚提取率的影響不顯著。二次項(xiàng)AA、BB、CC、DD、AB、AC與AD的P值均小于0.05，說(shuō)明這些因素的交互作用影響顯著，BC、BD與CD的P值都大于0.05，說(shuō)明這幾個(gè)因素的兩兩交互作用影響不顯著。因素交互作用對(duì)響應(yīng)值的影響結(jié)果可以通過(guò)圖5的響應(yīng)面曲面圖直觀地反映出來(lái)。使用Minitab15.0軟件求解回歸方程，得到南極磷蝦多酚的最佳提取參數(shù)為：乙醇濃度80.0%，提取時(shí)間69.1min，提取溫度35.5℃，物料比1：9.7。在此條件下，預(yù)測(cè)多酚提取率為1.231mg／g，考慮實(shí)際提取操作，將南極磷蝦多酚提取條件修正為乙醇濃度80%，提取時(shí)間70min，提取溫度35.5C，物料比1：10。使用修正參數(shù)進(jìn)行南極磷蝦多酚提取實(shí)驗(yàn)，測(cè)得多酚得率為1.227mg／g，與預(yù)測(cè)值基本對(duì)應(yīng)，說(shuō)明使用Minitab15.0軟件擬合得到的南極磷蝦多酚提取工藝參數(shù)真實(shí)可靠，具有實(shí)際提取應(yīng)用價(jià)值。

三、結(jié)論

本研究通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化南極磷蝦多酚提取參數(shù)（乙醇濃度、提取時(shí)間、提取溫度、物料比），最終確定最佳提取條件為：乙醇濃度80%，提取時(shí)間70min，提取溫度35.5℃，物料比1：10，在此條件下南極磷蝦多酚提取得率為1.227mg／g。采用有機(jī)溶劑浸提法提取南極磷蝦多酚物質(zhì)具有綠色簡(jiǎn)便，高效經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)，具有實(shí)際提取應(yīng)用價(jià)值，且為進(jìn)一步研究南極磷蝦多酚的類型及功能活性提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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