北方偉業(yè)計量集團有限公司
4、體外抗氧化活性試驗
(1)對DPPH自由基的清除能力
以質(zhì)量濃度為橫坐標,清除率為縱坐標作圖,得到各樣品質(zhì)量濃度與DPPH自由基清除率的關(guān)系,試驗結(jié)果見圖2~5。由圖2~5可知,隨著各樣品質(zhì)量濃度的增加,對DPPH自由基的清除率均逐漸升高。當黑果腺肋花楸提取物供試液濃度為186.40μg/mL,矢車菊素-3-O-葡萄糖苷供試液濃度為15.04μg/mL,氯化矢車菊素供試液濃度為5.19μg/mL,VC供試液的濃度為12.76μg/mL時,清除率均可達到50%,試驗結(jié)果見表3,氯化矢車菊素對DPPH自由基的清除能力最強,黑果腺肋花楸提取物對DPPH自由基具有一定的清除活性。
(2)FRAP法測定總的抗氧化能力
以FeSO4濃度C為橫坐標,測得的吸光度A為縱坐標,進行線性擬合,得到FeSO4標準曲線為:A=0.0262C一0.0275,R2=0.9996。將測得的樣品吸光度值帶入標準曲線方程,抗氧化活性以相同吸光度值的FeSO4當量濃度表示,記為FRAP值。由圖6~9可知,當VC樣品液的濃度為7.27μg/mL,黑果腺肋花楸提取物供試液的濃度為157.7μg/mL,矢車菊素樣品液濃度為11.35μg/mL,氯化矢車菊素樣品液濃度為5.52μg/mL,硫酸亞鐵當量濃度可達到30μg/mL,試驗結(jié)果見表3,說明氯化矢車菊素的還原能力最強,黑果腺肋花楸提取物具有一定的還原能力。
(3)鉬酸銨法測定總的抗氧化能力
以VC質(zhì)量濃度為橫坐標,測得的吸光度A為縱坐標,進行線性擬合,得到VC抗氧化能力標準曲線為:A=240.28C-101.67,R2=0.9966。將測得的樣品吸光度值帶入標準曲線方程,抗氧化活性以相同吸光度值的VC當量濃度表示。由圖10~13可知,當氯化矢車菊素樣品液的濃度為0.082mg/mL,黑果腺肋花楸花青素供試液的濃度為1.63mg/mL,矢車菊素樣品液濃度為0.1722mg/mL,VC當量濃度可達到30μg/mL,試驗結(jié)果見表3,說明說明氯化矢車菊素的還原能力最強,黑果腺肋花楸提取物具有一定的還原能力。
三、結(jié)論與討論
1、本試驗對黑果腺肋花楸提取物中氯化矢車菊素含量的HPLC測定方法進行考察,結(jié)果表明建立的含量測定方法操作簡便,精密度高,重復(fù)性及線性關(guān)系良好;
2、本試驗采用酸化甲醇溶液經(jīng)沸水浴水解提取花青素,在相關(guān)文獻的基礎(chǔ)上,通過正交試驗進一步考察了水解提取花青素工藝參數(shù),試驗結(jié)果表明,最佳提取工藝為:水解溫度100℃、水解時間2h、溶劑酸濃度3%鹽酸甲醇。在優(yōu)化水解提取條件下,氯化矢車菊素的含量為1.8570mg/g。該方法操作簡單,具有快速、高效、環(huán)保等優(yōu)點,為黑果腺肋花楸果活性成分的提取提供了一種新方法;
3、體外抗氧化活性的試驗結(jié)果表明:黑果腺肋花楸提取物對DPPH自由基具有一定的清除活性,隨著其質(zhì)量濃度的增加,清除活性明顯增強,并且氯化矢車菊素對DPPH自由基的清除能力強于黑果腺肋花楸提取物;FRAP法和鉬酸銨法測定各樣品液總還原力,結(jié)果表明黑果腺肋花楸提取物具有一定的抗氧化活性,兩種測定方法中氯化矢車菊素的抗氧化性最強。上述試驗結(jié)果為黑果腺肋花楸果在食品、飲料、制藥等領(lǐng)域的應(yīng)用提供了工作基礎(chǔ),為黑果腺肋花楸果的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。
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