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          高效液相色譜法測定黑果腺肋花楸提取物中氯化矢車菊素的含量及抗氧化性研究(三)

          發(fā)布時間:2021-02-11 11:43 編輯者:周世紅

          4、體外抗氧化活性試驗

          (1)對DPPH自由基的清除能力

          以質(zhì)量濃度為橫坐標,清除率為縱坐標作圖,得到各樣品質(zhì)量濃度與DPPH自由基清除率的關(guān)系,試驗結(jié)果見圖2~5。由圖2~5可知,隨著各樣品質(zhì)量濃度的增加,對DPPH自由基的清除率均逐漸升高。當黑果腺肋花楸提取物供試液濃度為186.40μg/mL,矢車菊素-3-O-葡萄糖苷供試液濃度為15.04μg/mL,氯化矢車菊素供試液濃度為5.19μg/mL,VC供試液的濃度為12.76μg/mL時,清除率均可達到50%,試驗結(jié)果見表3,氯化矢車菊素對DPPH自由基的清除能力最強,黑果腺肋花楸提取物對DPPH自由基具有一定的清除活性。

           

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          (2)FRAP法測定總的抗氧化能力
          以FeSO4濃度C為橫坐標,測得的吸光度A為縱坐標,進行線性擬合,得到FeSO4標準曲線為:A=0.0262C一0.0275,R2=0.9996。將測得的樣品吸光度值帶入標準曲線方程,抗氧化活性以相同吸光度值的FeSO4當量濃度表示,記為FRAP值。由圖6~9可知,當VC樣品液的濃度為7.27μg/mL,黑果腺肋花楸提取物供試液的濃度為157.7μg/mL,矢車菊素樣品液濃度為11.35μg/mL,氯化矢車菊素樣品液濃度為5.52μg/mL,硫酸亞鐵當量濃度可達到30μg/mL,試驗結(jié)果見表3,說明氯化矢車菊素的還原能力最強,黑果腺肋花楸提取物具有一定的還原能力。

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          (3)鉬酸銨法測定總的抗氧化能力
          以VC質(zhì)量濃度為橫坐標,測得的吸光度A為縱坐標,進行線性擬合,得到VC抗氧化能力標準曲線為:A=240.28C-101.67,R2=0.9966。將測得的樣品吸光度值帶入標準曲線方程,抗氧化活性以相同吸光度值的VC當量濃度表示。由圖10~13可知,當氯化矢車菊素樣品液的濃度為0.082mg/mL,黑果腺肋花楸花青素供試液的濃度為1.63mg/mL,矢車菊素樣品液濃度為0.1722mg/mL,VC當量濃度可達到30μg/mL,試驗結(jié)果見表3,說明說明氯化矢車菊素的還原能力最強,黑果腺肋花楸提取物具有一定的還原能力。
           

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          三、結(jié)論與討論

          1、本試驗對黑果腺肋花楸提取物中氯化矢車菊素含量的HPLC測定方法進行考察,結(jié)果表明建立的含量測定方法操作簡便,精密度高,重復(fù)性及線性關(guān)系良好;

          2、本試驗采用酸化甲醇溶液經(jīng)沸水浴水解提取花青素,在相關(guān)文獻的基礎(chǔ)上,通過正交試驗進一步考察了水解提取花青素工藝參數(shù),試驗結(jié)果表明,最佳提取工藝為:水解溫度100℃、水解時間2h、溶劑酸濃度3%鹽酸甲醇。在優(yōu)化水解提取條件下,氯化矢車菊素的含量為1.8570mg/g。該方法操作簡單,具有快速、高效、環(huán)保等優(yōu)點,為黑果腺肋花楸果活性成分的提取提供了一種新方法;

          3、體外抗氧化活性的試驗結(jié)果表明:黑果腺肋花楸提取物對DPPH自由基具有一定的清除活性,隨著其質(zhì)量濃度的增加,清除活性明顯增強,并且氯化矢車菊素對DPPH自由基的清除能力強于黑果腺肋花楸提取物;FRAP法和鉬酸銨法測定各樣品液總還原力,結(jié)果表明黑果腺肋花楸提取物具有一定的抗氧化活性,兩種測定方法中氯化矢車菊素的抗氧化性最強。上述試驗結(jié)果為黑果腺肋花楸果在食品、飲料、制藥等領(lǐng)域的應(yīng)用提供了工作基礎(chǔ),為黑果腺肋花楸果的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。

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          相關(guān)鏈接:自由基,氯化矢車菊素,葡萄糖苷,硫酸亞鐵

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