致瀉大腸埃希氏菌是一類能引起人體腹瀉的食源性病源微生物，它所產(chǎn)生的致病物質(zhì)主要包括定居因子、黏附素、外毒素以及腸毒素等，不同類型的致瀉大腸埃希氏菌的侵襲部位以及產(chǎn)生的致病物質(zhì)均有差別，可經(jīng)食物和飲用水在人群中廣泛傳播，造成嚴(yán)重疫情。

對(duì)致瀉大腸埃希氏菌檢測(cè)與甄別方法為選擇性分離、生化鑒定、血清學(xué)鑒定等，實(shí)驗(yàn)周期較長，且一般實(shí)驗(yàn)室很難擁有完備的大腸桿菌診斷血清。為方便廣大客戶，北納生物參考《GB 4789-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)》設(shè)計(jì)針對(duì)不同致瀉大腸埃希氏菌毒力基因特異性引物探針，用來鑒別檢測(cè)腸道集聚性大腸埃希氏菌（EAEC）、腸侵襲性大腸埃希氏菌（EIEC）等，也對(duì)致瀉大腸埃希氏菌的控制預(yù)防及流行監(jiān)控有著十分重要的作用。

產(chǎn)品目錄：

BNCC自主研制的致瀉大腸埃希氏菌核酸檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法），可用于疑似污染的水、糞便、食物等樣本中致瀉大腸埃希氏菌感染的輔助診斷。該檢測(cè)試劑盒質(zhì)量穩(wěn)定，特異性強(qiáng)，靈敏度高（見下圖）

使用方法：

1.試劑準(zhǔn)備（在試劑準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行）

取出包裝盒中的各組分(凍干粉除外)，室溫放置，待其溫度平衡至室溫后，混勻后瞬時(shí)離心備用。

2.樣品處理-增菌（根據(jù)GB.4789 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)）

3.DNA提取-根據(jù)相關(guān)DNA提取試劑盒進(jìn)行樣品核酸提取

4.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N（N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照），將反應(yīng)液分裝到PCR反應(yīng)管中，21μL/管。

將待測(cè)樣品的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

5.PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

注意事項(xiàng)：

1.試劑盒應(yīng)避光低溫保存；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心，避免氣泡產(chǎn)生；

3.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)使用一次性吸頭、一次性手套和穿戴專用工作服；

4.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；

5.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理；

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