北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃) |
| 傳代方法 | 1.溶解： 收到質粒干粉后，請加入 20μl 無菌水至管底，溶解質粒，室溫靜置 1min； 2.混合（吸附質粒）： 200μl 感受態(tài)細胞 + 質粒 DNA 5~10μl 混勻，冰上放置 30min； 3.熱激導入： 42℃靜置 90s； 4.收縮膜孔： 冰浴 2min； 5.修復培養(yǎng)： 毎管加 800μl LB 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min； 6.篩選培養(yǎng)： 將適當體積（100 μl）的復蘇細胞，涂布在相應抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（瓊脂面務必干燥后）， 倒置培養(yǎng) 12-16h，出現菌落。 7.提?。? 挑取單克隆菌落至相應抗性 LB 液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng) 12-16h，根據試驗需要提取質粒。 |
| 生長條件 | LB +氨芐青霉素，37℃（克隆菌株Stbl3,8890bp） |
| 存儲條件 | 2-8℃ |
| 安全等級 | 1 |
| 應用領域 | pMDLg/pRRE是第三代慢病毒包裝輔助質粒，載有病毒gag和pol基因。 pMDLg/pRRE與pRSV-Rev（JY03037）和pMD2.G（JY03027）構成第三代慢病毒包裝系統(tǒng)，用于包裝第三代慢病毒載體質粒，這4個質粒組成四質粒系統(tǒng)（即第三代慢病毒系統(tǒng)）。 將這4個質粒共同轉染293T等細胞以包裝重組慢病毒，用此慢病毒感染目的細胞，即可實現基因敲除、敲降和過表達等。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 |
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