（3）響應(yīng)面交互作用分析

將其中的一個(gè)因素固定為0水平，可得到另外兩個(gè)因素對(duì)得率相互影響的結(jié)果，使用Design—Expert8.0軟件進(jìn)行分析獲得的響應(yīng)面圖及等高線圖見圖5。響應(yīng)面圖可以直觀地評(píng)價(jià)液料比、超聲時(shí)間和超聲溫度間的交互作用及對(duì)辣椒油樹脂得率的影響，響應(yīng)面圖曲率越大，這兩個(gè)因素之間的差異就越顯著。等高線的形狀不同，交互作用的強(qiáng)弱也不同，交互項(xiàng)的等高線圖越近似橢圓形，表明交互作用越顯著。在這3組交互作用中，液料比與超聲溫度的交互效應(yīng)最強(qiáng)，液料比與超聲時(shí)間的交互效應(yīng)次之，超聲溫度與超聲時(shí)間的交互效應(yīng)最弱，這與表3顯著性分析結(jié)果一致。

4、優(yōu)化工藝驗(yàn)證

根據(jù)DesignExpert軟件，對(duì)回歸方程進(jìn)行求解，預(yù)測(cè)出辣椒油樹脂最佳提取條件：液料比8.09:1mL／g，超聲溫度44.32℃，超聲時(shí)間27.55min，辣椒油樹脂得率可高達(dá)6.09％。考慮到實(shí)驗(yàn)條件的限制及操作的方便性，將各因素修正為：超聲溫度45℃，超聲時(shí)間30rain，液料比8:1mL／g，并對(duì)此進(jìn)行三次平行試驗(yàn)驗(yàn)證，得到辣椒油樹脂得率為6.01％，與理論預(yù)測(cè)值相比，相差約為1.20％，說明模型可信度較高。

5、體外抗氧化活性研究

（1）還原力測(cè)定

還原力測(cè)定以普魯士藍(lán)生成量為指標(biāo)，樣品若將鐵離子還原成亞鐵離子，再與三價(jià)鐵生成普魯士藍(lán)會(huì)使其在700nm處吸光值增強(qiáng)。圖6顯示，隨著樣品濃度的增大，辣椒油樹脂提取物的吸光值增大，表明其還原力逐漸增強(qiáng)。在0.40～1.20mg／mL濃度范圍內(nèi)，辣椒油樹脂的還原力呈線性增加。當(dāng)濃度大于1.20mg／mL時(shí)，其還原力增長(zhǎng)較迅速。

（2）DPPH自由基清除力測(cè)定

DPPH基團(tuán)具有單電子，其紫色醇溶液在517nm處具有強(qiáng)吸收。當(dāng)存在自由基清除劑時(shí)，會(huì)與DPPH自由基的單電子配對(duì)而使其吸收逐漸消失，故可用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析。由圖7可以看出，辣椒油樹脂提取物清除DPPH自由基能力與其濃度成正比。對(duì)辣椒油樹脂對(duì)DPPH·的清除率曲線進(jìn)行回歸分析，得其線性回歸方程為Y=55.25℃+8.05，R²=0.9720，可知其半抑制濃度（50％inhibitoryconcentration，IC₅₀）約為0.76mg／mL。當(dāng)樣品溶液濃度低于0.40mg／mL時(shí)，DPPH·的清除率的增長(zhǎng)平緩，在0.40～0.80mg／mL范圍內(nèi)，樣品溶液自由基清除率的增長(zhǎng)速率增大。整體來看，辣椒油樹脂清除率增長(zhǎng)趨勢(shì)與VC基本一致。

（3）清除ABTS⁺自由基

不同濃度的樣品溶液對(duì)ABTS⁺的清除力如圖8所示，在0.40～1.20mg／mL范圍內(nèi)，辣椒油樹脂對(duì)ABTS⁺的清除率呈線性關(guān)系。樣品濃度在1.20～1.60mg／mL范圍內(nèi)其清除率增加速率較快，當(dāng)濃度超過1.60mg／mL時(shí)，清除率增長(zhǎng)減緩。辣椒油樹脂清除ABTS⁺的線性回歸方程為：Y=37.725C-0.99，R²=0.9957，通過方程求得辣椒油樹脂清除ABTS⁺的IC₅₀為1.35mg／mL，表明其具有良好的清除ABTS⁺的能力。

6、抑菌性研究

（1）抑菌活性測(cè)定

由圖9中的a～c可見，辣椒油樹脂對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和枯草芽孢桿菌均形成明顯的抑菌圈，表明辣椒油樹脂對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌均有抑制作用。由表4可知，在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，其抑菌效果與樣品濃度成正比。在固定樣品濃度為5mg／mL時(shí)，金黃色葡萄球菌的抑菌圈（12.43mm）明顯大于另兩種菌，而枯草芽孢桿菌和大腸桿菌的抑菌圈直徑相差不大。表明辣椒油樹脂對(duì)細(xì)菌具有廣譜的抑菌作用，其中對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強(qiáng)。

（2）最低抑菌濃度分析

由表5可以看出，辣椒油樹脂對(duì)不同細(xì)菌的最低抑菌濃度不同，金黃色葡萄球菌的MIC為1.25mg／mL，枯草芽孢桿菌和大腸桿菌的MIC為2.5mg／mL，表明辣椒油樹脂對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌活性最強(qiáng)，對(duì)枯草芽孢桿菌和大腸桿菌的抑菌活性較弱，這符合抑菌能力越強(qiáng)，最低抑菌濃度越小的規(guī)律。

三、結(jié)論

利用超聲輔助提取辣椒粉中的辣椒油樹脂混合物，通過單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面分析法優(yōu)化其提取工藝，確定最優(yōu)提取工藝為：液料比8:1mL／g、超聲溫度45℃、超聲時(shí)間30min，辣椒油樹脂得率可達(dá)到6.01％，與蔡君等采用超臨界CO₂提取重慶朝天椒辣椒油樹脂的得率（6.70％）相差不大，且設(shè)備要求低。此外，還討論了辣椒油樹脂的體外抗氧化活性和抑菌作用。陶紅等對(duì)辣椒油樹脂純化產(chǎn)物進(jìn)行抗氧化性研究發(fā)現(xiàn)，其產(chǎn)物清除DPPH自由基的IC₅₀為0.36mg／mL，與本試驗(yàn)未純化產(chǎn)物相差不大。

黃肖苗等研究朝天椒提取物的抑菌活性，在相近樣品濃度下其對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果（8.50mm）明顯低于辣椒油樹脂的抑菌效果。這表明，辣椒油樹脂提取物具有很好的抗氧化活性和對(duì)細(xì)菌的廣譜抑菌活性，為天然辣椒產(chǎn)品的開發(fā)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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