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          膠體粒子與蛋白質(zhì)相互作用及其應(yīng)用(三)

          發(fā)布時間:2021-11-12 20:47 編輯者:特邀作者周世紅

          2.5 BLG-膠體粒子體系黏度測定

          如圖5所示,在膠體粒子A分散的BLG蛋白溶液體系中,BLG溶液黏度隨蛋白濃度提高有極小上升趨勢,可能是由于分子間的引力沒有明顯變化。而B與C膠體粒子分散的體系中,在蛋白濃度較低時黏度趨勢不變,而隨著蛋白濃度進(jìn)一步提高,蛋白表觀黏度也有微小上升趨勢,可能是由于蛋白溶液分子內(nèi)的氫鍵作用增強(qiáng)從而引起黏度的增加。用宏觀流變的方法測得溶液的黏度如表4所示。通過比較宏觀與微觀的黏度值,發(fā)現(xiàn)膠體粒子C分散的溶液黏度與宏觀測得的黏度差距最小,說明動態(tài)光散射利用膠體粒子所測得的黏度是真實(shí)有效的,其中膠體粒子C與BLG相互作用最弱,膠體粒子C更適宜微觀測黏度。

          2.6 BSA-膠體粒子體系黏度測定

          圖6顯示隨著蛋白濃度的提高,蛋白溶液黏度有所波動。膠體粒子B分散的體系中,隨蛋白濃度的提高,蛋白溶液黏度有輕微上升趨勢。膠體粒子C分散的體系中,同BLG一樣,在較低濃度時蛋白溶液黏度沒有隨蛋白濃度提高而發(fā)生明顯變化,而在蛋白濃度較高時,蛋白溶液黏度有輕微上升趨勢。如表5所示,結(jié)合宏觀測得的黏度進(jìn)行顯著性分析,可以看出pH7.4條件下,膠體粒子A,B,C均適宜測量BSA溶液黏度。

          2.7 OVA-膠體粒子體系黏度測定

          如圖7所示,隨著濃度的提高,OVA溶液黏度有所波動,整體趨于穩(wěn)定,可能是由于蛋白濃度過低,蛋白分子間的氫鍵作用較弱導(dǎo)致黏度沒有顯著變化。結(jié)合表6,膠體粒子B微觀測得的黏度與宏觀無顯著性差異。因此,通過DLS選擇合適的膠體粒子微觀測得的黏度值可以信賴??赡軐ξ⒂^測量結(jié)果造成偏差的主要原因有:1)顆粒團(tuán)聚,本研究在試驗(yàn)前均將分散體系充分搖晃,但即便如此,也無法保證顆粒在分散體系中不會出現(xiàn)顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。2)顆粒在待測液體樣品中可能存在分布不均勻的情況,局部顆粒濃度過高可能會導(dǎo)致多重散射的現(xiàn)象。

          3 結(jié)論

          本文利用光散射技術(shù)監(jiān)測蛋白-膠體粒子體系的相互作用,優(yōu)化了一種有效的微觀測定溶液黏度的方法,增加了研究蛋白分子構(gòu)象及溶液性質(zhì)的另一個維度。結(jié)果表明,膠體粒子的粒徑和蛋白濃度均對粒子間的相互作用影響較小,而膠體粒子與蛋白質(zhì)表面帶電性質(zhì)卻顯著影響分子間的相互作用,且對體系黏度測定也有較大影響。因此利用黏度測定的方法監(jiān)測分子間的相互作用是可行的。此外,比較宏觀與微觀測得的黏度值,發(fā)現(xiàn)表面接有羧基的膠體粒子在測量溶液黏度時適用性較高。這也說明了DLS微觀測得的黏度值是真實(shí)有效的,且DLS測量蛋白溶液黏度具有顯著的優(yōu)勢。

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