1.2 測定方法

1.2.1 土壤養(yǎng)分指標(biāo)測定

參照魯如坤的方法測定土壤化學(xué)指標(biāo)。采用水浸提電位法測定pH，水土質(zhì)量比為2.5∶1；重鉻酸鉀容量法測定有機(jī)質(zhì)含量；采用高錳酸鉀氧化法測定溶解性有機(jī)碳（Dissolvedorganiccarbon，DOC）；半微量凱氏定氮法測定總氮；乙酸銨交換法測定陽離子交換量（CEC）；堿解擴(kuò)散法測定堿解氮含量；碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗比色法測定速效磷；醋酸銨浸提-火焰光度法測定速效鉀含量。

1.2.2 土壤微生物數(shù)量測定

參照林先貴的平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)法測定土壤微生物數(shù)量。細(xì)菌、真菌和放線菌分別用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬丁孟加拉紅-鏈霉素培養(yǎng)基和高氏1號培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)，121℃滅菌20min，重復(fù)3次。主要過程如下：準(zhǔn)確稱取10g新鮮土壤樣品，放入裝有90mL無菌水以及小玻璃珠的三角瓶中，180r/min震蕩30min，使微生物細(xì)胞充分分散后靜置1min，得到10^-1梯度稀釋液。使用移液器吸取1mL的10^-1梯度稀釋液至裝有9mL無菌水試管中，反復(fù)吹吸若干次，混合均勻，得到10^-2梯度稀釋液，以此類推，連續(xù)稀釋成10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7和10^-8梯度稀釋菌液。初篩后發(fā)現(xiàn)，測定細(xì)菌和放線菌數(shù)量時(shí)選用10^-6、10^-7梯度的稀釋菌液測定真菌時(shí)選用10^-5梯度的稀釋菌液較為合適。吸取1mL稀釋液滴置于無菌培養(yǎng)皿中，加入冷卻至45℃左右的培養(yǎng)基12～15mL，立即混合均勻，凝固后，轉(zhuǎn)入28℃恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

計(jì)算公式：CFU/g＝平均數(shù)×10×稀釋倍數(shù)/（1-含水率）

1.2.3 煙葉化學(xué)成分測定

參考《中國煙草種植區(qū)劃》的方法測定烤煙化學(xué)成分，包括總植物堿、總氮、還原糖、總糖、鉀、氯等指標(biāo)，計(jì)算糖堿比、氮堿比、鉀氯比和兩糖比。

1.2.4 經(jīng)濟(jì)性狀測定

各處理小區(qū)煙葉單獨(dú)采收編桿，單獨(dú)計(jì)產(chǎn)。待各處理煙葉全部采收烘烤完畢后，根據(jù)烤煙國標(biāo)（GB2635—92）進(jìn)行分級，參照2019年煙葉收購價(jià)格計(jì)算產(chǎn)值，統(tǒng)計(jì)煙葉產(chǎn)量和上等煙比例。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用MicrosoftExcel2010和SPSS20.0進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計(jì)分析，單因素法方差分析和Duncan’s新復(fù)極差法比較檢驗(yàn)顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對煙株農(nóng)藝性狀的影響

由表2可見，與單獨(dú)深耕或綠肥掩青相比，條施生物炭3000kg/hm2和撒施4500kg/hm2顯著增加了株高、葉片數(shù)、莖圍和葉面積；深耕配合穴施750kg/hm²生物炭增加了煙株莖圍和葉面積；綠肥掩青配合穴施750kg/hm²生物炭增加了煙株株高、葉片數(shù)、莖圍和葉面積。深耕或綠肥掩青條件下撒施7kg/hm²生物炭對煙株株高影響不顯著，但增加了有效葉片數(shù)、莖圍和葉面積。

2.2不同處理對經(jīng)濟(jì)性狀的影響

由表3可見，與單獨(dú)深耕或綠肥掩青相比，條施生物炭3000kg/hm²、撒施4500kg/hm²和穴施750kg/hm²顯著增加了煙葉產(chǎn)量。深耕或綠肥掩青條件下配施生物炭均顯著增加了煙葉產(chǎn)值，其中綠肥+穴施生物炭750kg/hm²、綠肥+撒施生物炭4500kg/hm²處理后的產(chǎn)值較高，其次為深耕+條施生物炭3000kg/hm²、綠肥+條施生物炭7500kg/hm²、綠肥+條施生物炭3000kg/hm²、深耕+條施生物炭7500kg/hm²。單獨(dú)深耕處理后的煙葉產(chǎn)值較低。深耕條件下，除條施1500kg/hm²外，其他生物炭處理均顯著提高了烤煙均價(jià)和上等煙比例。與單獨(dú)深耕相比較，綠肥掩青后配施生物炭后烤煙均價(jià)和上等煙比例增加明顯。
 

2.3不同處理對煙葉化學(xué)成分的影響

由表4可見，與單獨(dú)深耕或綠肥掩青相比，生物炭施用3000kg/hm²以上和穴施750kg/hm²均降低了C3F煙葉煙堿含量。配施生物炭后煙葉總氮含量降低，這可能與施用生物炭降低了土壤堿解氮含量有關(guān)。深耕配施生物炭撒施4500kg/hm²和穴施750kg/hm²條件下，煙葉還原糖、總糖、鉀含量以及糖堿比、氮堿比和鉀氯比均顯著提高。綠肥掩青后條施生物炭3000kg/hm²、撒施4500kg/hm²和穴施750kg/hm²條件下，煙葉還原糖、總糖、鉀含量以及糖堿比和氮堿比增加明顯。綠肥掩青后，施用生物炭提高了煙葉鉀氯比。與單獨(dú)深耕或綠肥掩青相比，施用生物炭降低了煙葉氯含量，兩糖比無顯著變化。

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