便可通片為治療便秘的創(chuàng)新中藥，是湖南時代陽光藥業(yè)股份有限公司具有知識產(chǎn)權(quán)的獨家品種，處方由生地黃、玄參、當(dāng)歸、桃仁、肉蓯蓉、火麻仁、決明子、枳實、蘆薈9味中藥組成，是在全國名老中醫(yī)劉炳凡老先生經(jīng)驗方基礎(chǔ)上研制成的中藥片劑，具有養(yǎng)陰生津，潤腸通便的功效，用于治療功能性便秘。臨床研究表明，便可通片對治療陰虛血瘀型功能性便秘具有較好的療效，可明顯改善患者臨床癥狀，縮短排便間隔天數(shù)和每次排便時間，療程短，停藥后隨訪療效較好，無明顯不良反應(yīng)。目前中成藥標(biāo)準(zhǔn)普遍采用單一成分進(jìn)行研究，難以全面表征處方的物質(zhì)基礎(chǔ)。便可通片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）中僅對處方中的阿魏酸進(jìn)行定量測定，標(biāo)準(zhǔn)較簡單，且阿魏酸含量較低，難以全面控制產(chǎn)品質(zhì)量。本課題組首次對不同批次便可通片進(jìn)行高效液相（HPLC）指紋圖譜研究，并對其中的主要有效成分松果菊苷、柚皮苷、新橙皮苷、蘆薈苷進(jìn)行定量測定。

1儀器與材料

1.1儀器

DionexUltiMate3000系列高效液相色譜儀（美國Thermofisher公司）；Quintix224-1CN電子分析天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；KM-500DB超聲波清洗儀（功率500W，頻率40kHz，昆山市美美超聲儀器有限公司）。

1.2材料

對照品蘆薈苷（批號：110787-201808,92.4%）、新橙皮苷（批號：111857-201804，純度：99.4%）、柚皮苷（批號：110722-201805，純度：91.7%）、松果菊苷（批號：111670-201907，純度：91.8%）、蘆薈大黃素（批號：110795-201007，純度：98%），中國食品藥品檢定研究院；甲醇為色譜純，美國天地公司；水為超純水；其他試劑均為分析純。

生地黃、玄參、當(dāng)歸、桃仁、肉蓯蓉、火麻仁、決明子、枳實、蘆薈飲片均由湖南時代陽光藥業(yè)股份有限公司提供，經(jīng)湖南省中醫(yī)藥研究院生藥室劉浩副研究員鑒定，分別為玄參科植物生地RehmanniaglutinosaLibosch.的干燥塊根、玄參科植物玄參ScrophularianingpoensisHemsl.的干燥根、傘形科植物當(dāng)歸Angelicasinensis(Oliv.)Diels的干燥根、薔薇科植物桃Prunuspersica(L.)Batsch的干燥成熟種子、列當(dāng)科植物肉蓯蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma的干燥帶鱗葉肉質(zhì)莖、桑科植物大麻CannabissativeL.的干燥成熟果實、豆科植物決明CassiaobtusifoliaL.的干燥成熟種子、蕓香科植物酸橙CitrusaurantiumL.的干燥幼果、百合科植物庫拉索蘆薈AloebarbadensisMiller植物葉的汁液濃縮干燥物。

便可通片10批，湖南時代陽光藥業(yè)股份有限公司提供，批號分別為：20190601(S1）、20190602(S2）、20190603(S3）、20191201(S4）、20191202(S5）、20191203(S6）、20191204(S7）、20200101(S8）、20200102(S9）、20200103(S10）。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱：InertSustainC₁₈(4.6mm×250mm,5μm），流動相：甲醇（A)-0.1%冰醋酸水溶液（B）梯度洗脫（0～10min：20%～40%A；10～20min：40%A；20～30min：40%～42%A；30～50min：42%～47%A；50～80min：47%～60%A；80～90min：60%～90%A；90～100min：90%A）。檢測波長：300nm；流速：1mL·min^-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL；理論塔板數(shù)以蘆薈苷計不低于5000。

2.2溶液的制備

2.2.1對照品溶液的制備

精密稱取蘆薈苷、柚皮苷、新橙皮苷、松果菊苷、蘆薈大黃素對照品適量，蘆薈苷用流動相甲醇-0.1%冰醋酸水溶液（39∶61）溶解并定容，配成含蘆薈苷質(zhì)量濃度為0.9235mg·mL^-1的對照品溶液，其余對照品用甲醇溶解并定容，配成柚皮苷質(zhì)量濃度為0.7561mg·mL^-1、新橙皮苷量濃度為0.7510mg·mL^-1、松果菊苷質(zhì)量濃度為0.5196mg·mL^-1、蘆薈大黃素0.5488mg·mL^-1的對照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備

取本品適量，除去包衣，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置50mL棕色量瓶中，加甲醇適量，超聲處理（功率500W，頻率40kHz，溫度低于25℃）20min；放冷，加甲醇稀釋至刻度線，搖勻，濾過，取續(xù)濾液過0.45μm微孔濾膜，即得。

2.3方法學(xué)考察

2.3.1精密度試驗

精密吸取同一便可通片（S1）供試品溶液10μL，按“2.1”項下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣測定6次，記錄其色譜圖。以9號峰（蘆薈苷）為參照峰，計算16個共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果各共有峰的相對保留時間和相對峰面積的RSD分別為0.01%～0.07%和0.91%～9.38%，其中，蘆薈苷、柚皮苷、新橙皮苷和松果菊苷峰面積RSD分別為2.16%、1.16%、1.15%和2.86%，表明儀器精密度良好，符合指紋圖譜的要求。

2.3.2重復(fù)性試驗

取便可通片（S1)6份，精密稱定，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件依次進(jìn)樣，記錄色譜圖。以9號峰（蘆薈苷）為參照峰，計算16個共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果各共有峰的相對保留時間和相對峰面積的RSD分別為0.01%～0.14%和1.16%～9.81%。蘆薈苷、柚皮苷、新橙皮苷和松果菊苷峰面積RSD分別為0.88%、1.83%、2.10%和1.50%。結(jié)果表明該方法重復(fù)性好。

2.3.3穩(wěn)定性試驗

精密吸取同一便可通片（S1）供試品溶液10μL，按“2.1”項下色譜條件，分別于0、4、8、12、16、24h進(jìn)行測定，記錄色譜圖。以9號峰（蘆薈苷）為參照峰，計算16個共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果各共有峰的相對保留時間和相對峰面積的RSD分別為0.02%～0.27%和1.49%～8.14%。蘆薈苷、柚皮苷、新橙皮苷和松果菊苷峰面積RSD分別為3.87%、2.50%、2.40%和3.97%。結(jié)果表明供試品溶液于24h內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)定。

2.4指紋圖譜研究

2.4.1便可通片指紋圖譜的建立

取10批次便可通片樣品（S1～S10），精密稱定，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件依次進(jìn)樣，記錄色譜圖。采用國家藥典委員會“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”（2004A版）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理，設(shè)定S1為參照圖譜，其他樣品的色譜峰與參照圖譜進(jìn)行自動匹配，生成便可通片指紋圖譜，見圖1。以峰9為參照峰（S），計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積，見表1、2。

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