(三)超臨界流體色譜法在農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用

1987年，J．R．Wheeler等就報道了采用超臨界流體色譜法對農(nóng)藥殘留的檢測，樣品用CN柱分離，電子捕獲檢測器、氮磷檢測器和紫外檢測器串聯(lián)在線檢測。填充柱超臨界色譜法通常在保證較高分離度的情況下，分析時間比高效液相色譜縮短60％～80％，對于復(fù)雜的樣品也會有滿意的分離效果。Kenan Dost等采用填充柱超臨界流體色譜大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜法，同時對土壤中3種不同結(jié)構(gòu)類型的農(nóng)藥進行了檢測。其中包括三氮苯類除草劑莠去津和莠滅凈，氨基甲酸酯類殺蟲劑克百威，磺酰脲類除草劑芐嘧磺隆、氯磺隆和甲磺隆。超臨界流體色譜條件：CN柱(25cm×4.5mm，內(nèi)徑)，柱前壓20MPa，超臨界流體CO₂的流量2 mL／min，改性劑甲醇10%，柱溫50℃，10μL定量管；質(zhì)譜條件：離子源溫度120℃，四極桿溫度300℃，放電電壓3 kV，錐孔電壓20～70 V，氮氣流速200L/h，掃描范圍100～500(1.33s)。6種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液為0.5mg/mL(甲醇)。

在錐孔電壓20V都能發(fā)現(xiàn)各種農(nóng)藥的準(zhǔn)分子離子峰，如莠去津m/z 216、莠滅凈m/z 228、克百威m/z 222、芐嘧磺隆m/z 411、氯磺隆m／z 358和甲磺隆m/z 382。其中莠去津、莠滅凈、克百威和芐嘧磺隆準(zhǔn)分子離子峰均為基峰；氯磺隆和甲磺隆的基峰不是準(zhǔn)分子離子峰，而是m/z 141離子碎片峰。選擇離子檢測方式定量分析，方法檢出限和線性回歸指數(shù)(0.1～50μg/mL)。土壤樣品粉碎后取2g，加入10 mL甲醇或二氯甲烷超聲振蕩提取30 min，過濾后即可進樣分析。添加的濃度相當(dāng)于每針進樣含500 ng、100ng和10ng組分。

二、高效毛細管電泳法

毛細管電泳始于20世紀60年代。高效毛細管電泳法(high performance capillary electrophoresis，HPcE)是目前研究最多的色譜新方法，這種方法沒有流動相和固定相的區(qū)分，而是依靠外加電場的驅(qū)動令帶電離子在毛細管中沿電場方向移動，由于離子的帶電狀況、質(zhì)量、形態(tài)等的差異使不同離子相互分離。高效毛細管電泳法沒有高效液相色譜法(HPLC)中存在的傳質(zhì)阻力、渦流擴散等降低柱效的因素，縱向擴散也因為毛細管壁的雙電層的存在而受到抑制，因而能夠達到很高的理論塔板數(shù)，有極好的分離效果。

毛細管電泳從運行模式上可分為自由區(qū)帶電泳(CZE)、等電聚集電泳(CIEF)、等速電泳(CITP)等。高效毛細管電泳或毛細管電分離法(CESM)，是一類以毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動力的液相分離分析技術(shù)，是繼高效液相色譜之后的又一重大技術(shù)進展，它使分析科學(xué)得以從微升水平進入納升水平，被人們稱為20世紀90年代分析化學(xué)界最重要的事件之一。這種技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物大分子(如DNA測序、蛋白質(zhì))分離上。在農(nóng)藥殘留分析上，高效液相色譜法難以分析的農(nóng)藥品種(如磺酰脲類除草劑)已有了毛細管電泳與質(zhì)譜聯(lián)用測定的報道。

(一)高效毛細管電泳法的特點

高效毛細管電泳法的優(yōu)點是分離通道毛細管一般不需填充或復(fù)雜處理過程，價格較低，為色譜柱的10％～20％；運行環(huán)境是在水介質(zhì)緩沖溶液中，而高效液相色譜常采用有機溶劑，易造成二次污染；樣品消耗量很小，每次進樣量僅為納升級，可以活體進樣；在直流電場驅(qū)動下運行，緩沖液的消耗量約為色譜溶劑消耗量的10^-6；分離柱效高，尤其在分離生物大分子時，有不可取代的優(yōu)點，理論塔板可達40萬/m以上；應(yīng)用范圍廣，而且對樣品的預(yù)處理要求較低；無機離子、有機離子和電中性分子都可以用同一根毛細管柱進行分離，僅僅需要改變運行的緩沖液，而不需要像色譜分析那樣經(jīng)常更換不同固定相的色譜柱。其缺點是定量分析的再現(xiàn)性差，納升級進樣在技術(shù)上尚需改進；靈敏度難以滿足要求(需要在線富集或超高靈敏度的檢測器)；電滲變化對分離重現(xiàn)性有較大影響。

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